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溶劑效應(yīng)在液相色譜中的運用

  溶劑按化學(xué)組成分為有機溶劑和無機溶劑,而波譜中的應(yīng)用中常用的是有機溶劑。有機溶劑是一大類在生活和生產(chǎn)中廣泛應(yīng)用的有機化合物,分子量不大,常溫下呈液態(tài)。溶劑效應(yīng)是指溶劑對于反應(yīng)速率,平衡甚至反應(yīng)機理的影響。溶劑對化學(xué)反應(yīng)速率常數(shù)的影響依賴于溶劑化反應(yīng)分子和相應(yīng)溶劑化過渡態(tài)的相對穩(wěn)定性。

  溶劑效應(yīng)在液相色譜中的影響

  在液相色譜中樣品溶液的溶劑強度強于流動相溶劑強度時可能會造成的峰展寬、峰分叉現(xiàn)象。

  主要表現(xiàn)為色譜圖上較早洗脫的峰扭曲變形或者開叉,與此同時較晚洗脫的峰則較為尖銳與對稱,這些現(xiàn)象顯示一個比較特殊的起因――樣品溶液的溶劑很可能強于流動相。例如樣品溶液的溶劑是100%乙腈(100%的強溶劑),而流動相的組成則較弱,18%的乙腈與72%的水。第一個峰是開叉的,并且與第二個峰相比,明顯地變寬了。當(dāng)樣品溶液的溶劑變成流動相時,所有的峰形都改善了,且變得尖銳。

  當(dāng)樣品進樣時,有可能出現(xiàn)峰展寬,最佳的樣品溶液組成和體積將會保持在10%甚至更低,在這個例子里,當(dāng)樣品溶劑與流動相溶劑強度不同時,換句話來說,也就是樣品未用流動相溶解,因此,有些樣品分子溶解在強溶劑(100%ACE),并隨強溶劑流過柱子,而有些則溶解在流動相中,從而導(dǎo)致峰分叉。

  當(dāng)樣品與流動相強度相差較小,進樣影響也會小,第一個峰可能會寬于第二個峰,而當(dāng)這種展寬導(dǎo)致必要的分離度降低時,這樣情況應(yīng)引起注意,例如使用一根短柱,和5UL進樣,這與最佳進樣體積4UL相近,用了極性更強的溶劑導(dǎo)致分離度明顯的降低。

  避免液相色譜出現(xiàn)這類問題的方法

  盡量用流動相來溶解樣品,對于梯度洗脫,采用初始的流動相比例。對于在流動相中溶解度小,必須用強溶劑的時候,減少進樣體積以消除溶劑效應(yīng)的影響。


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