賽智科技應(yīng)用檢測部參考中國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（NY/T 1372-2007），利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色譜儀經(jīng)實踐檢測可提供飼料中三聚氰胺的HPLC檢測方案，得出的結(jié)果準(zhǔn)確可靠，檢出限好，適用于配合飼料、濃縮飼料、添加劑預(yù)混合飼料、植物性蛋白飼料、寵物飼料（干糧、罐頭）中三聚氰胺的測定，僅供廣大用戶參考。

以下是飼料中三聚氰胺的測定的詳細(xì)檢測方法。

• 1   儀器與試劑

• 1.1  儀器

• LC-10Tvp高效液相色譜儀

• Vertex 色譜柱　150mm×4.6mm×5μm

• 超聲波清洗器

• 渦旋混合器

• 離心機(jī)：10，000r/min

• 氮吹儀，可控溫至60℃

• 固相萃取裝置

• 高速勻質(zhì)器

• 索氏提取器
  

• 震蕩搖床

• 1.2 試劑

• 甲醇，色譜純。
  

• 乙腈，色譜純。
  

• 氨水。
  

• 混合型陽離子交換固相萃取柱。
  

• 氨水甲醇溶液。
  

• 乙酸鉛溶液。
  

• 濾膜，0.45μm，有機(jī)相。
  

• 甲醇溶液。
  

• 庚烷磺酸鈉。
  

• 檸檬酸。
  

• 三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品：純度≥99%。

• 2 試樣溶液的制備

• 2.1 提取
  

• 配合飼料、濃縮飼料、添加劑預(yù)混合飼料、植物性蛋白飼料、寵物飼料（干糧）中三聚氰胺的提取。稱取試樣適量，準(zhǔn)確加入三氯乙酸溶液，再加入乙酸鉛溶液。搖勻，超聲提取。靜置，取上層提取液轉(zhuǎn)入離心管，在10,000r/min離心機(jī)上離心。
  寵物飼料（罐頭）中三聚氰胺的提取。稱取試樣適量，加入乙醚，搖床上120r/min振蕩，棄去乙醚，再加入乙醚，搖床上120r/min振蕩，棄去乙醚，其余步驟同上。

• 2.2  凈化
  

• 分別用甲醇，水活化混合型陽離子交換固相萃取柱，準(zhǔn)確移取離心液分次上柱，控制過柱速度在1mL/min以內(nèi)。再用水和甲醇洗滌混合型陽離子交換固相萃取柱，抽近干后用氨水甲醇溶液洗脫。洗脫液50℃氮氣吹干，準(zhǔn)確加入甲醇溶液，渦旋振蕩1min，過0.45μm濾膜，上機(jī)測定。

• 3 色譜條件

• 色譜柱：Vertex 色譜柱　150mm×4.6mm×5μm；
  

• 流動相：庚烷磺酸鈉+檸檬酸+乙腈；
  

• 流速：1.0mL/min;
  

• 溫度：室溫；
  

• 檢測波長：240nm；
  

• 進(jìn)樣量：20μL。

• 4 三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖