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食品中香蘭素的高效液相色譜儀(HPLC)檢測(cè)方案
香蘭素(Vanillin),又名香草醛,為一種廣泛使用的可食用香料,可在香莢蘭的種子中找到,也可以人工合成,有濃烈奶香氣息。廣泛運(yùn)用在各種需要增加奶香氣息的調(diào)香食品中,如蛋糕、冷飲、巧克力、糖果;還可用于香皂、牙膏、香水、橡膠、塑料、醫(yī)藥品。
目前還沒(méi)有相關(guān)報(bào)道說(shuō)香蘭素對(duì)人體有害。 但是不可過(guò)量,據(jù)歐盟專家委員會(huì)2000年2月24日?qǐng)?bào)導(dǎo),大劑量可導(dǎo)致頭痛、惡心、嘔吐、呼吸困難,甚至損傷肝、腎等,故正商訂降低允許劑量中。
賽智科技利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色譜儀,經(jīng)實(shí)踐檢驗(yàn)可提供食品中香蘭素的HPLC檢測(cè)方案,得出的結(jié)果準(zhǔn)確可靠,檢出限好,適用于食品類添加香蘭素的測(cè)定,僅供廣大用戶參考。
以下是食品中香蘭素的液相色譜儀測(cè)定的詳細(xì)檢測(cè)方法。
1 儀器與試劑
1.1 儀器
LC-10Tvp高效液相色譜儀;
Vertex 色譜柱 250mm×4.6mm×5μm;
超聲波水??;
萬(wàn)分之一天平;
組織搗碎機(jī);
微孔濾膜:0.45μm,水相。
1.2 試劑
甲醇:色譜純。
無(wú)水乙醇。
磷酸溶液:0.01mol/L
香蘭素標(biāo)準(zhǔn)工作液:稱取一定量的香蘭素用流動(dòng)相溶解配置成100mg/l的溶液,逐級(jí)稀釋到一定的濃度作為工作液。
2 測(cè)定原理
樣品加適量乙醇經(jīng)超聲波提取,經(jīng)高效液相色譜儀測(cè)定,外標(biāo)法定量。
3 色譜條件
色譜柱:Vertex 色譜柱 250mm×4.6mm×5μm;
流動(dòng)相:甲醇+磷酸水溶液0.01mol/L(25+75);
流速:1 mL/min;
進(jìn)樣量:20μL;
檢測(cè)波長(zhǎng):350nm。
4 試樣溶液的制備
樣品制備:固體樣品經(jīng)組織搗碎機(jī)搗碎混勻后備用;液體樣品搖勻后備用。
試樣處理:準(zhǔn)確稱取一定量的(精確至0.01g)試樣至500mL離心管中,加入20mL乙醇,混勻,經(jīng)超聲波浸提30min后,4000r/min離心5min,取上清液1ml,加入4ml的流動(dòng)相,混勻,經(jīng)0.45μm微孔濾膜過(guò)濾后,待液相色譜測(cè)定。
5 結(jié)果分析
在添加0.25g/kg-5.0g/kg范圍內(nèi),回收率在89%-106之間,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于5%。
色譜圖如下圖所示,其峰型較好,滿足日常檢測(cè)要求。
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