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高效液相色譜儀中包括多種分離方式。從不同的角度出發(fā)，可以得到不同的分類結(jié)果。按色譜過程的分離機(jī)制，可將液相色譜法分為吸附色譜、分配色譜、空間排阻色譜、離子交換色譜及親和色譜等類別。根據(jù)流動(dòng)性與固定相極性的差別，也可分為正相色譜和反向色譜兩種模式。流動(dòng)性極性大于固定相極性時(shí)，稱為反向色譜;反之，稱為正相色譜。

吸附色譜法：固定相為吸附劑，靠組分在吸附劑上吸附系數(shù)的差別而達(dá)到分離目的。

分配色譜法：高效液相色譜中最常用的模式，付定向?yàn)橐簯B(tài)，利用樣品組分在固定相與流動(dòng)相中的溶解度不同所產(chǎn)生的的分配系數(shù)差別而達(dá)到分離的目的。

空間排阻色譜法：采用凝膠作為固定相，依樣品組分的分子尺寸與凝膠孔徑間的關(guān)系即滲透系數(shù)的差別而分離。

離子交換色譜法：采用離子交換樹脂作為固定相，依樣品離子與固定相表面離子交換基團(tuán)的交換能力的差別而分離。

親和色譜法：將具有生物活性的配基鍵合到載體或基質(zhì)表面上形成固定相，利用蛋白質(zhì)或生物大分子與固定相表面上配基的專屬親和力進(jìn)行分離。

化學(xué)鍵合相色譜法：將固定相的官能團(tuán)鍵合在載體表面，所形成的固定相稱為化學(xué)鍵合相。反向鍵合相色譜是目前應(yīng)用最為廣泛的液相色譜儀分離法之一。