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高效液相色譜儀硅膠鍵合相的穩(wěn)定性：

1、鍵合相的使用壽命取決于鍵合的有機官能團在硅膠表面的覆蓋程度。當(dāng)覆蓋量大或呈多分子覆蓋層時，會增加穩(wěn)定性。

2、通常正相鍵合相的穩(wěn)定性低于反相鍵合相。

3、反相烷基鍵合相的穩(wěn)定性與使用的流動相的PH值有關(guān)，通常水溶液的PH= 2～8。

4、硅膠中的殘留硅醇基會對色譜分離產(chǎn)生不良影響。

鍵合相色譜分離的重現(xiàn)性：由于鍵合相制備時選用基體硅膠特性的差別和鍵合反應(yīng)時官能團覆蓋量的不同，會產(chǎn)生載體誘導(dǎo)選擇性的變化。

鍵合相色譜分離的選擇性：在反相色譜中，高效液相色譜儀使用同一種ODS固定相，并用兩種極性相近但由不同溶劑組成的流動相時，會由于溶劑誘導(dǎo)選擇性的變化，而獲得不同的分析結(jié)果。

疏水塌陷：鍵合相色譜柱在有機溶劑含量低甚至100%水流動相條件下，一旦流速停止，推動水溶液流動相進入硅膠孔隙的壓力減小，高效液相色譜儀疏水的微孔表面排斥極性流動相，會發(fā)生鍵合相孔隙脫水，從而導(dǎo)致所謂的疏水塌陷，對化合物的保留能力大大減弱。