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在實驗室使用高效液相色譜儀進行分離之前，必須明確建立方法的基本思路和分析目的。主要包括如下幾個方面：

一、檢測目的。是對部分組分的定量分析、一種組分的檢出、樣品中未知組分的確認或者純化分離。

二、分離目的。是否有必要解析出樣品中所有組分?

三、定量分析。準確度與精密度的具體要求是什么?

四、樣品基質(zhì)?？赡苌婕暗臉悠坊|(zhì)有幾種，樣品的存在形態(tài)也可能相同，是否需要建立不同的方法?

五、樣品量。需要分析的樣品批量是多少?需要綜合考慮方法的通量。

六、樣品預(yù)處理方式。樣品來源形成不同，預(yù)處理辦法也不同。包括：

1可直接進樣的溶液;

2 需稀釋、加pH緩沖液、加內(nèi)標或其他定容操作的溶液;

3需要首先溶解或提前處理的固體樣品;

4 需預(yù)處理以除去干擾物，避免色譜柱或一起損壞樣品。

七、裝備與人員條件。了解高效液相色譜儀設(shè)備、人員技能、色譜柱是否恒溫?HPLC系統(tǒng)能否進行梯度洗脫?