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荷葉系屬睡蓮科屬植物，生在水、池塘或湖泊中，在我國南北方均有栽培，《本草綱目》記載："荷葉服之，令人瘦劣，單服可以消陽水浮之氣"。荷葉除了含有普通植物所共有的碳水化合物、脂類、蛋白質(zhì)、單寧等常規(guī)化學(xué)成分外,還含有具有明顯生物活性和生理功能的黃酮化合物和生物堿這兩大類物質(zhì)。 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明, 荷葉黃酮具有抗氧化、抗衰老、清熱、降血脂、降膽固醇及治療心腦血管疾病等藥用保健功能。1991年11月中華人民共和國衛(wèi)生部將荷葉列入第二批藥食兩用名單之中。

荷葉中的黃酮類化合物主要有荷葉苷，其次是次是槲皮素、異槲皮素等常見的黃酮類物質(zhì)。Awatif等從荷葉中分離出nympholide A，nympholide B和myricetin-3"-(6"p-coumaroyl)glucoside(見圖1、圖2、圖3)三種黃酮類物質(zhì)。我國荷葉資源十分豐富，從荷葉中提取的黃酮類物質(zhì)安全，無毒無害。荷葉黃酮類物質(zhì)經(jīng)試驗(yàn)表明，有明顯的體外抗氧化作用，是能夠清除鏈引發(fā)階段的自由基，或(和)直接捕獲自由基反應(yīng)鏈中的自由基的，能夠起到預(yù)防和斷鏈雙重作用的。

對(duì)于荷葉中黃酮類化合物，賽智科技采用高效液相色譜法，準(zhǔn)確測定黃酮類化合物含量，下面以槲皮素為例。 以下是賽智科技利用LC-10Tvp高效液相色譜儀對(duì)荷葉中槲皮素進(jìn)行的HPLC檢測方案。 

（本應(yīng)用方案請(qǐng)勿轉(zhuǎn)載，侵權(quán)必究）

1、儀器與試劑

1.1儀器、設(shè)備

LC-10Tvp高效液相色譜儀

分析天平

水浴回流裝置

針頭過濾器

微孔濾膜：0.45μm

1.2試劑

甲醇（HPLC）

乙腈（HPLC）

磷酸（AR）

鹽酸（AR）

2、供試品溶液和對(duì)照品溶液的制備

對(duì)照品溶液的制備   取槲皮素對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成合適濃度的溶液，即得。

供試品溶液的制備 取干燥荷葉適量，研成細(xì)粉。取本品粉末（過6號(hào)篩）約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入醇100ml，水浴回流90min，回收甲醇，殘?jiān)芗尤爰状?5%鹽酸（4：1）的混合液10ml，準(zhǔn)確稱定質(zhì)量，水浴回流30min，放冷，再稱定質(zhì)量，用甲醇補(bǔ)足減失的量，搖勻，過濾，取續(xù)濾液，過0.45um濾膜，即得。

3、色譜條件

色譜柱：C18, 4. 6 mmx250 mm，粒度5 μm

流動(dòng)相：以乙腈-0.4%磷酸=35:65

波長：360nm

柱溫：25℃

流速：1. 0 mL/min

4、測定法

分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，即得

5、色譜圖