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賽智科技應(yīng)用檢測部參考中國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（NY/T 1372-2007），利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色譜儀經(jīng)實(shí)踐檢測可提供飼料中三聚氰胺的HPLC檢測方案，得出的結(jié)果準(zhǔn)確可靠，檢出限好，適用于配合飼料、濃縮飼料、添加劑預(yù)混合飼料、植物性蛋白飼料、寵物飼料（干糧、罐頭）中三聚氰胺的測定，方案僅供參考。

以下是飼料中三聚氰胺的測定的詳細(xì)檢測方法。

1、儀器與試劑

1.1  儀器

LC-10Tvp高效液相色譜儀

Vertex 色譜柱　150mm×4.6mm×5μm

超聲波清洗器

渦旋混合器

離心機(jī)：10，000r/min

氮吹儀，可控溫至60℃

固相萃取裝置

高速勻質(zhì)器

索氏提取器

震蕩搖床

1.2 試劑

甲醇，色譜純。

乙腈，色譜純。

氨水。

混合型陽離子交換固相萃取柱。

氨水甲醇溶液。

乙酸鉛溶液。

濾膜，0.45μm，有機(jī)相。

甲醇溶液。

庚烷磺酸鈉。

檸檬酸。

三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品：純度≥99%。

2、試樣溶液的制備

2.1 提取

配合飼料、濃縮飼料、添加劑預(yù)混合飼料、植物性蛋白飼料、寵物飼料（干糧）中三聚氰胺的提取。稱取試樣適量，準(zhǔn)確加入三氯乙酸溶液，再加入乙酸鉛溶液。搖勻，超聲提取。靜置，取上層提取液轉(zhuǎn)入離心管，在10,000r/min離心機(jī)上離心。

寵物飼料（罐頭）中三聚氰胺的提取。稱取試樣適量，加入乙醚，搖床上120r/min振蕩，棄去乙醚，再加入乙醚，搖床上120r/min振蕩，棄去乙醚，其余步驟同上。

2.2  凈化

分別用甲醇，水活化混合型陽離子交換固相萃取柱，準(zhǔn)確移取離心液分次上柱，控制過柱速度在1mL/min以內(nèi)。再用水和甲醇洗滌混合型陽離子交換固相萃取柱，抽近干后用氨水甲醇溶液洗脫。洗脫液50℃氮?dú)獯蹈?，?zhǔn)確加入甲醇溶液，渦旋振蕩1min，過0.45μm濾膜，上機(jī)測定。

3、色譜條件

色譜柱：Vertex 色譜柱　150mm×4.6mm×5μm；

流動(dòng)相：庚烷磺酸鈉+檸檬酸+乙腈；

流速：1.0mL/min;

溫度：室溫；

檢測波長：240nm；

進(jìn)樣量：20μL。

4、色譜圖