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蜂王漿中10-羥基-2-癸烯酸的HPLC測(cè)定

10-羥基-2-癸烯酸又稱(chēng)王漿酸。是從蜂王漿中分離出一種特殊的不飽和有機(jī)酸,是蜂王漿質(zhì)量的重要指標(biāo)之一,一般含量在1.4%~2.4%之間,約占總脂肪酸的50%以上。分離出的純王漿酸呈白色晶體,在新鮮的蜂王漿中多以游離形式存在,性質(zhì)比較穩(wěn)定,有很好的殺菌、抑菌作用和抗癌、抗放射的功能。10-羥基-Δ2-癸烯酸對(duì)保護(hù)王漿中的活性物質(zhì)有重要的意義而且大大提高了蜂王漿的保健和醫(yī)療的效用。

儀器設(shè)備:

LC-10T高效液相色譜儀:配紫外檢測(cè)器

分析天平:感量分別為0.01mg、0.0001g 和0.001g。

離心機(jī):轉(zhuǎn)速≥3000r/min。

超聲波清洗器:功率 250W,頻率33kHz。

色譜條件:

色譜柱: C18  250mm*4.6mm 5μm

流動(dòng)相:甲醇+水+磷酸

流速: 1.0mL/min

柱溫:35℃

檢測(cè)波長(zhǎng):210nm

進(jìn)樣量:10μl

本方法所用試劑均為分析純,水為GB/T 6682規(guī)定的一級(jí)水試劑

磷酸

鹽酸:含量:36%~38%

甲醇:色譜純

無(wú)水乙醇

硅藻土:化學(xué)純,粒徑范圍:0.2~0.8mm。

試樣經(jīng)乙醇或甲醇提取后,用高效液相色譜進(jìn)行測(cè)定,以保留時(shí)間定性,峰面積外標(biāo)法定量。

標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制:

10-羥基-2-癸烯酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:稱(chēng)取10mg(準(zhǔn)確至0.01mg)10-羥基-2-癸烯酸標(biāo)準(zhǔn)品于10mL容量瓶中,用無(wú)水乙醇溶解并定容至刻度,搖勻。此溶液濃度為1.0 mg/mL。

10-羥基-2-癸烯酸標(biāo)準(zhǔn)系列工作液:分別準(zhǔn)確吸取10-羥基-2-癸烯酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0.02mL、0.10mL、0.20mL、0.50mL、1.00mL于 10.0mL容量瓶中,用無(wú)水乙醇稀釋至刻度,搖勻,得濃度分別為2.0ug/mL、10.0ug/mL、20.0ug/mL、50.0ug/mL、100ug/mL的標(biāo)準(zhǔn)系列工作液。

鹽酸溶液(0.01mol/L):準(zhǔn)確吸取鹽酸0.9mL,緩慢加入1000mL水,混勻。微孔濾膜:0.45um,有機(jī)相。

色譜圖


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